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        生化試劑盒

        總糖含量試劑盒-可見分光光度法

        測定意義:

        糖類物質是構成植物體的重要組成成分之一,也是新陳代謝的主要原料和貯存物質。總糖也可稱為碳水化合物,包括可溶性的單糖,二糖以及不溶性的淀粉,纖維素,幾丁質等。

        中文名稱 總糖含量試劑盒
        規格 48樣
        貨號

        E-318-SH

        價格 ¥280
        樣本類型 血清,血漿,組織勻漿,細胞裂解液、細胞培養上清液等
        檢測范圍 詳見說明書
        檢測方法 可見分光光度法
        貨期 3-5天
        說明書 咨詢我司業務員獲取
        文獻 咨詢我司業務員獲取


        測定意義:

        糖類物質是構成植物體的重要組成成分之一,也是新陳代謝的主要原料和貯存物質。總糖也可稱為碳水化合物,包括可溶性的單糖,二糖以及不溶性的淀粉,纖維素,幾丁質等。

         

        測定原理

        總糖酸水解為還原糖,在NaOH和丙三醇存在下,DNS試劑與還原糖共熱后被還原成氨基化合物,在過量的NaOH堿性溶液中呈桔紅色,在540nm處有最大吸收峰,以此測定樣品中的總糖含量。

            正式測定前請選擇2-3個預期差異較大的樣本做預測定

         

        自備的儀器和用品:

        可見分光光度計/酶標儀、沸水浴、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水。

         

        試劑的組成和配制:

        試劑一:液體100mL×1瓶,4℃保存;

        試劑二:液體100mL×1 4℃保存;

        試劑三:液體5mL×1 4℃避光保存;

         

        樣品中糖的提取

        組織:稱取約0.1g樣品,加入1mL 試劑一,1.5mL蒸餾水,勻漿,95℃水浴中加熱30min,加入1mL試劑二,混勻,用蒸餾水定容至10mL8000g 25℃離心10min,取上清液待測。(注意稀釋,見注意事項)

        液體樣本:取0.1mL樣本,加入1mL 試劑一,1.5mL蒸餾水,勻漿,95℃水浴中加熱30min,加入1mL試劑二,8000g 25℃離心10min,取上清液待測。(注意稀釋,見注意事項)

         

        測定步驟:

        1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至540nm,蒸餾水調零。

        2、調節水浴鍋至95度。

        3、加樣表

        試劑(μL

        空白管

        測定管

        樣本

         

        8

        蒸餾水

        16

        8

        試劑三

        12

        12

        混勻,置95水浴中10min(蓋緊,以防止水分散失),冷卻至室溫

        蒸餾水

         172

        172

        混勻,540nm測定吸光值,ΔA=A測定管-A空白管

        注意:1、空白管只要做一管。

               2、如果ΔA大于2,需要將上清液用蒸餾水稀釋,計算公式中乘以相應稀釋倍數。

         

        糖含量計算:

        1、標準條件下測定的回歸方程為y = 0.3002x - 0.0507x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。

        2、按樣本鮮重計算:

        糖(mg /g鮮重)= [(ΔA0.0507) ÷0.3002×V1]÷V1÷V2)×稀釋倍數=33.311×(ΔA0.0507) ÷W×稀釋倍數

        3、按樣本蛋白濃度計算:

        糖(mg /mg prot=[(ΔA0.0507) ÷0.3002×V1]÷(V1×Cpr) ×稀釋倍數=3.3311×(ΔA0.0507) ÷Cpr×稀釋倍數

        V1:加入樣本體積,0.008mLV2:加入提取液體積,10mL Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣本鮮重,g

        4、按照液體體積計算:

        糖(mg /mL=[(ΔA0.0507) ÷0.3002×V1]÷V3×V1÷V2)×稀釋倍數=116.59×(ΔA0.0507)×稀釋倍數

        V1:加入樣本體積,0.008mLV2:加入提取液體積,10mL/3.5mL V3:液體樣本,0.1mLCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣本鮮重,g

         

        注意:最低檢測限為1mg/g鮮重或10ng/mg prot

         


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        在線詢價

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