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        生化試劑盒

        總膽固醇(TC)含量試劑盒-可見分光光度法
        恒遠生物生化試劑盒應用領域廣泛,涉及酶類、氧化應激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機鹽離子、脂質代謝、植物抗逆性等。檢測樣本類型豐富,涉及多種體液、組織、細胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測儀器為酶標儀,分光光度計和熒光酶標儀。我們將以高度的責任感和出色的產品質量為客戶提供高效專業(yè)的生化代測服務和實驗技術解決方案。豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、極具競爭力的價格,所有這些保證了我們向您提供的最專業(yè)最優(yōu)質的服務。

        中文名稱

        總膽固醇(TC)含量試劑盒-可見分光光度法

        規(guī)格 48樣
        貨號

        L-738-SH

        價格 ¥200
        樣本類型 血清,血漿,組織勻漿,細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清液等
        檢測范圍 詳見說明書
        檢測方法

        可見分光光度法

        貨期 3-5天
        說明書 咨詢我司業(yè)務員獲取
        文獻 咨詢我司業(yè)務員獲取

            正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

        測定意義:

        TC包括游離膽固醇和膽固醇酯。TC是指組織中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。

         

        測定原理:

        利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇(FC)和游離脂肪酸(FFA),從而把膽固醇酯轉化為FC;進一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;最后利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰,其顏色深淺與TC含量成正比。

         

        自備儀器和用品:

        可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液槍、1mL玻璃比色皿、異丙醇和蒸餾水。

         

        試劑組成和配

        試劑一:異丙醇50mL(自備)。

        試劑二:液體50mL×1瓶,4℃保存;

        試劑三粉劑×1瓶,4℃保存;

        試劑四:液體100μL×1瓶,4℃保存

        TC標準品:液體1mL×1支,0.5μmol/mL,4℃保存。

         

        TC的提?。?/span>

        1、組織中TC的提取:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,8000g 4℃離心10min,取上清,即TC待測液。

        2、細胞、細菌中TC的提取:先收集400-500萬細胞或細菌到離心管內,棄上清,加1mL試劑一,超聲波破碎1min(強度20%,超聲2s,停1s),即TC待測液。

        3、血清(漿)等樣品:直接測定。

         

        測定操作:

        1. 分光光度計預熱30 min,調節(jié)波長到500 nm,蒸餾水調零。

        2. TC工作液的配制:臨用前,吸取約0.8mL試劑二分別加入試劑三和試劑四瓶中,充分溶解后再全部轉移回試劑二瓶中,充分混勻,TC工作液置于37℃水浴10min。用不完的工作液4℃保存一周。

        3. 標準管:依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL FC標準液和900μL TC工作液,混勻,37℃靜置3h后于500nm測定A標準管。

        4. 測定管:依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL FC待測液和900μL TC工作液,混勻,37℃靜置3h后于500nm測定A測定管。

        5. 空白管:依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL 試劑一900μL TC工作液,混勻,37℃靜置3h后于500nm測定A測定管。

        注意:標準管和空白管只需測定一次。

         

        計算公式:

        1. 血清(漿)TC含量:

        TCμ mol /dL= C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)×100

        = 50×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)

        C標準液:0.5μmol/mL;100 mL1dL=100 mL

        2. 組織TC含量:

        (1)按樣本蛋白濃度計算

        TCμ mol/mg prot= C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷Cpr

           = 0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷Cpr

        (2)按樣本質量計算

        TCμ mol / g鮮重= C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷W

        0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷W

        C標準液:0.5μmol/mL;樣本蛋白濃度,mg/mL;W樣本質量,g/mL

        3. 細胞、細菌中TC含量:

        TCμ mol /104 cell= C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷細菌或細胞(104 cell /L

        0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷細菌或細胞(104 cell /L

        C標準液:0.5μmol/mL。

         

        注意事項:

        最低檢出限為1nmol/mL。

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