生化試劑盒
- 脂肪酶(LPS)試劑盒-可見分光光度法
- 恒遠生物生化試劑盒應用領域廣泛，涉及酶類、氧化應激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機鹽離子、脂質代謝、植物抗逆性等。檢測樣本類型豐富，涉及多種體液、組織、細胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測儀器為酶標儀，分光光度計和熒光酶標儀。我們將以高度的責任感和出色的產品質量為客戶提供高效專業的生化代測服務和實驗技術解決方案。豐富的經驗、優良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、極具競爭力的價格，所有這些保證了我們向您提供的最專業最優質的服務。
| 中文名稱 |
脂肪酶(LPS)試劑盒 |
| 規格 | 48樣 |
| 貨號 |
L-722-SH |
| 價格 | ￥320 |
| 樣本類型 | 血清，血漿，組織勻漿，細胞裂解液、細胞培養上清液等 |
| 檢測范圍 | 詳見說明書 |
| 檢測方法 |
可見分光光度法 |
| 貨期 | 3-5天 |
| 說明書 | 咨詢我司業務員獲取 |
| 文獻 | 咨詢我司業務員獲取 |
注 意 ：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
LPS又稱甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和單酯）。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中LPS的異常增高常見于胰腺炎和胰腺癌。
測定原理：
LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用銅皂法測定脂肪酸生成速率，即可計算LPS活性。
自備儀器和用品：
研缽、臺式離心機、震蕩混勻器、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、甲苯100mL、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體90mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體14mL×1瓶，4℃保存。每次使用前用震蕩混勻器劇烈震蕩20min。
試劑三：甲苯100mL×1瓶，4℃保存（自備）。
試劑四：液體20mL×1瓶，4℃保存。
標準品：液體10μL×1瓶，10 μmol/mL的標準溶液，4℃保存。臨用前加入3.168 mL甲苯，充分溶解。
粗酶液提取：
1. 組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進行冰浴勻漿。12000g，4℃離心10min，取上清置冰上待測。
2. 細菌、真菌：按照細胞數量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后12000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體: 直接檢測。
LPS測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min以上，調節波長到710 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑一和試劑二置于37℃水浴預熱30min以上。
2. 在5mL EP管中依次加入下列試劑
|
試劑名稱（μL） |
空白管 |
測定管 |
|
蒸餾水 |
375 |
|
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樣本 |
|
125 |
|
試劑一 |
750 |
750 |
|
試劑二 |
|
250 |
37℃振蕩反應10 min
|
試劑三 |
2000 |
2000 |
|
試劑名稱（μL） |
空白管 |
測定管 |
標準管 |
|
上清液 |
1200 |
1200 |
|
|
標準品 |
|
|
1200 |
|
試劑四 |
300 |
300 |
300 |
37℃振蕩反應5 min后，靜置5min，取800μL上層液加入1 mL玻璃比色皿，于710nm處測定吸光值。
注意：空白管和標準管只需測定一次。
LPS活性計算公式：
1. 組織、細菌或細胞LPS活性
（1）按照蛋白濃度計算
活性單位定義：37℃中每毫克蛋白每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單位。
LPS (μmol/min/mg prot) = [C標準品×(A測定管-A空白管)÷（A標準管- A空白管）]×V反總÷（Cpr×V樣）÷T
=16×[(A測定管－A空白管)÷（A標準管- A空管）]÷Cpr
（2）按照樣本質量計算
活性單位定義：37℃中每克組織每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單位。
LPS (μmol/min/g 鮮重) = [C標準品×(A測定管-A空白管)÷（A標準管- A空白管）]×V反總÷（W×V樣÷V樣總）÷T
=16×[(A測定管－A空白管)÷（A標準管- A空白管）]÷W
（3）按照細菌或者細胞數量計算
活性單位定義：37℃中每104個細胞每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單位。
LPS (μmol /min/104cell) = [C標準品×(A測定管-A空白管)÷（A標準管- A空白管）]×V反總÷（細胞數量×V樣÷V樣總）÷T
=16×[(A測定管－A空白管)÷（A標準管- A空白管）]÷細胞數量
2. 血清等液體LPS活性
活性單位定義：37℃中每毫升血清每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單位。
LPS (μmol /min/mL) = [C標準品×(A測定管－A空白管)÷（A標準管- A空白管）]×V反總÷V樣÷T
=16×[(A測定管－A空白管)÷（A標準管- A空白管）]
C標準品：10 μmol/mL；V反總：反應總體積，2mL；V樣：反應中加入樣本體積，0.125mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：上清液蛋白質濃度，mg/mL，需要另外測定，建議使用本公司BCA蛋白質含量測定試劑盒；W：樣本質量，g；T：催化反應時間，10 min。
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